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萤火素酶互补技术服务
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发布日期:2021-08-16
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萤火素酶互补技术服务

原理:以萤火素(luciferin)为底物来检测萤火素酶(luciferase)的活性。在实验中, 萤火素酶蛋白被切成 N 端和 C 端 2 个功能片段, 即 NLuc(2–416aa)和 CLuc (398–550 aa),并分别连接在两个载体 pCAMBIA-1300-NLuc (pNL)和 pCAMBIA1300-CLuc (pCL)上。实验中, 待测的 2 个目标蛋白的编码序列分别连在两个载体上,将目标基因与报告基因融合, 获得含有目标基因的重组质粒。如果 2 个目标蛋白发生相互作用,萤火素酶的 NLuc 和 CLuc 就会在空间上足够靠近, 从而发挥萤火素酶活性,分解萤火素底物并产生荧光。

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