Nanjing baiyike Biotechnology Co., Ltd
原理:是利用重组技术将探针蛋白与GST谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过GST与固相化在球珠上的GSH谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。
Pull down 实验步骤:
基因优化及基因合成(亚克隆至原核表达载体中)
→转化表达宿主菌
→表达分析鉴定
→表达优化和可溶性分析
→1L表达纯化
→亲和纯化
→纯度鉴定(PAGE)
→Western blot/SDS-PAGE检测
→平衡树脂
→蛋白互作试验
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