CUT-Tag技术服务
介绍：CUT&Tag是蛋白质-DNA互作关系研究的新方法，是一种使用protein-A-TnS转 座体融合蛋白的连接方法。在CUT&Tag中，通透性细胞或细胞核与特定染色质 蛋白的抗体孵育，然后负载嵌镶末端接头的pA-TnS被连续地连接到抗体结合位 点。通过添加镁离子激活转座体，导致接头整合到附近的 DNA。然后这些基因被 扩增，生成 测序库，适用千无ChlP级别抗体的蛋白研究。有望将蛋白质-DNA互 作的研究变成一种类似PCR反应的常规操作，经过PCR扩增后形成可以直接用于高通量测序的文库，对基因调控、表观遗传等领域的研究具有革命性的意义。
技术原理
ChiTag是Protein A蛋白与Tn5转座酶的融合蛋白，当抗体结合目的蛋白（如转录因子、组蛋白等）后，Protein A蛋白可直
接结合抗体，携带的Tn5转座酶可特异性的切割目的蛋白附近的DNA片段，并将DNA片段连上接头，文库构建之后可进行高
通量测序。
技术优势
。样品起始量低：能够对及少量样品进行分析，可兼容低至60个细胞甚至单胞
。超高活性：兼具pG/A &TnS活性，DNA 片段化活性极高
。信噪比高：背景噪音低，所需测序深度少，信噪比显著优于Ch IP-Seq
。实验重复性好：平行样本之间的重复性好。实验重复结果保持一致
CUT&Tag与ChIP-Seq流程比较
CUT&Tag | ChIP-Seq |
细胞渗透性处理 | 甲醛交联渗透细胞 |
一抗与目的蛋白结合，二抗与一抗结合 | 细胞破碎，收集裂解液 |
pA-Tn5转座子与抗体结合 | 超声打断基因组DNA |
激活转座子，片段化目的蛋白局部DNA | 加入一抗与ProteinA磁珠,进行免疫沉淀 |
提取DNA，PCR，建库完成，高通量测序 | 洗脱，解交联 |
| DNA补平，加A，加平头 |
| PCR，建库完成，高通量测序 |
实验步骤
Western blot 检测→收集细胞→细胞与磁珠结合→目标蛋白与抗体共孵育→片段化→DNA 提取→文库构建及扩增→NGS 测序分
交付材料
CUT&Tag 检测，提供测序原始数据、分析报告、试验报告等；
实验报告（包括实验过程、检测结果等）。
